Holotranskobalamín, marker stavu vitamínu B-12: analytické aspekty a klinická užitočnosť 1, 2, 3, 4, 5
Abstrakt
Približne jedna štvrtina cirkulujúceho kobalamínu (vitamín B-12) sa viaže na transkobalamín (holoTC) a je tak dostupná pre bunky tela. Z tohto dôvodu sa holoTC označuje aj ako aktívny vitamín B-12. HoloTC bol navrhnutý ako optimálny marker skorého nedostatku vitamínu B-12 pred > 20 rokmi. Tento návrh viedol k vývoju vhodných testov na meranie zlúčeniny a klinickým štúdiám, ktorých cieľom bolo ukázať výhodu merania holoTC skôr ako vitamínu B-12. Dnes je možné holoTC analyzovať 3 metódami:
- priamym meraním komplexu medzi transkobalamínom a vitamínom B-12,
- meraním vitamínu B-12 naviazaného na transkobalamín
- alebo meraním množstva transkobalamínu nasýteného vitamínom B-12.
Tieto tri metódy poskytujú podobné výsledky, ale priame meranie holoTC komplexu je v klinickom prostredí z praktického hľadiska vhodnejšie. Meranie HoloTC sa ukázalo ako užitočné na identifikáciu niekoľkých pacientov, ktorí trpia nedostatkom transkobalamínu. Okrem toho je holoTC súčasťou testu CobaSorb, a preto je užitočný na hodnotenie absorpcie vitamínu B-12. Klinické štúdie, ktoré porovnávajú schopnosť holoTC a vitamínu B-12 identifikovať jedincov s nedostatkom vitamínu B-12 (zvýšená koncentrácia kyseliny metylmalónovej), naznačujú, že holoTC funguje lepšie ako celkový vitamín B-12. Doteraz sa holoTC nepoužívalo na hodnotenie stavu vitamínu B-12 na základe populácie, ale navrhujeme, aby holoTC bol pre takéto štúdie lepším markerom ako celkový vitamín B-12. Meranie HoloTC sa ukázalo ako užitočné na identifikáciu niekoľkých pacientov, ktorí trpia nedostatkom transkobalamínu. Okrem toho je holoTC súčasťou testu CobaSorb, a preto je užitočný na hodnotenie absorpcie vitamínu B-12. Klinické štúdie, ktoré porovnávajú schopnosť holoTC a vitamínu B-12 identifikovať jedincov s nedostatkom vitamínu B-12 (zvýšená koncentrácia kyseliny metylmalónovej), naznačujú, že holoTC funguje lepšie ako celkový vitamín B-12. Doteraz sa holoTC nepoužívalo na hodnotenie stavu vitamínu B-12 na základe populácie, ale navrhujeme, aby holoTC bol pre takéto štúdie lepším markerom ako celkový vitamín B-12. Meranie HoloTC sa ukázalo ako užitočné na identifikáciu niekoľkých pacientov, ktorí trpia nedostatkom transkobalamínu. Okrem toho je holoTC súčasťou testu CobaSorb, a preto je užitočný na hodnotenie absorpcie vitamínu B-12. Klinické štúdie, ktoré porovnávajú schopnosť holoTC a vitamínu B-12 identifikovať jedincov s nedostatkom vitamínu B-12 (zvýšená koncentrácia kyseliny metylmalónovej), naznačujú, že holoTC funguje lepšie ako celkový vitamín B-12. Doteraz sa holoTC nepoužívalo na hodnotenie stavu vitamínu B-12 na základe populácie, ale navrhujeme, aby holoTC bol pre takéto štúdie lepším markerom ako celkový vitamín B-12. Klinické štúdie, ktoré porovnávajú schopnosť holoTC a vitamínu B-12 identifikovať jedincov s nedostatkom vitamínu B-12 (zvýšená koncentrácia kyseliny metylmalónovej), naznačujú, že holoTC funguje lepšie ako celkový vitamín B-12. Doteraz sa holoTC nepoužívalo na hodnotenie stavu vitamínu B-12 na základe populácie, ale navrhujeme, aby holoTC bol pre takéto štúdie lepším markerom ako celkový vitamín B-12. Klinické štúdie, ktoré porovnávajú schopnosť holoTC a vitamínu B-12 identifikovať jedincov s nedostatkom vitamínu B-12 (zvýšená koncentrácia kyseliny metylmalónovej), naznačujú, že holoTC funguje lepšie ako celkový vitamín B-12. Doteraz sa holoTC nepoužívalo na hodnotenie stavu vitamínu B-12 na základe populácie, ale navrhujeme, aby holoTC bol pre takéto štúdie lepším markerom ako celkový vitamín B-12.
ÚVOD
Prečo sa meria kobalamín (vitamín B-12) a nie podiel vitamínu, ktorý môže vstúpiť do buniek, holotranskobalamín (holoTC)?
V osemdesiatych rokoch minulého storočia si túto otázku často kládol zosnulý Victor Herbert ( 1 ). V tom čase bolo možné holoTC merať iba výpočtom rozdielu medzi vitamínom B-12 (napr. 500 pmol/l) a frakciou vitamínu B-12, ktorá nebola naviazaná na transkobalamín (napr. 420 pmol/l). V dôsledku toho bola neistota hodnôt holoTC príliš veľká na to, aby umožnila správne vyhodnotenie klinickej užitočnosti holoTC v porovnaní s inými markermi stavu vitamínu B-12 [plazmatický kobalamín (vitamín B-12), homocysteín (tHcy) a kyselina metylmalónová ( MMA)]. Dnes je dostupných niekoľko vhodných metód na meranie holoTC a údaje o jeho analytických a klinických aspektoch sa rýchlo hromadia.
Tento prehľad sumarizuje súčasné poznatky o analytických aspektoch, determinantoch plazmatického holoTC a zaoberá sa aj klinickým účinkom holoTC v porovnaní s celkovým vitamínom B-12. Dospeli sme k záveru, že meranie holoTC bude pravdepodobne cenné aj pre celopopulačný skríning stavu vitamínu B-12.
HoloTC A INÉ MARKERY STAVU VITAMÍNU B-12
Vitamín B-12 v plazme sa viaže na 2 proteíny, transkobalamín a haptokorín (Obr. 1). Transkobalamín nesie menšiu časť cirkulujúceho vitamínu B-12 a iba ≈10 % bielkovín je nasýtených vitamínom B-12 ( 2 ). Transkobalamín transportuje vitamín B-12 do všetkých buniek tela a je zodpovedný za transport ≈4 nmol vitamínu B-12 každý deň ( 3 ).
Haptocorrin je takmer úplne nasýtený glykoproteín viažuci vitamín B-12 neznámej funkcie, ktorý nesie hlavnú časť cirkulujúceho vitamínu B-12 a okrem toho aj neaktívne formy vitamínu, takzvané analógy. Metabolizmus proteínu je pomalý, s obratom ≈0,1 nmol vitamínu B-12 každý deň ( 4 – 6 ).
My a iní sme zaviedli metódy na výskumné účely, ktoré sú vhodné na meranie transkobalamínu a haptokorínu, či už nasýtených alebo nie ( 7 – 9 ). Klinickí lekári sa však zaujímali najmä o merania celkového vitamínu B-12 ( 10 ) a holoTC.
Skutočnosť, že pre bunky je dostupný iba vitamín B-12, ktorý sa viaže na transkobalamín, podporila myšlienku, že meranie holoTC by bolo klinicky zmysluplnejšie ako meranie celkového vitamínu B-12 (všetok vitamín B-12, ktorý sa viaže na transkobalamín a haptokorín). Pred niekoľkými rokmi Victor Herbert navrhol určiť stav vitamínu B-12 pomocou holoTC ako prvého markera, ktorý sa zníži ( 11 ). Niekoľko štúdií o vegetariánskych populáciách potvrdilo tento koncept ( 12 , 13 ).
Zatiaľ čo plazmatické koncentrácie vitamínu B-12 a holoTC možno použiť ako mieru množstva vitamínu B-12 dostupného pre bunky tela, metabolity tHcy a MMA odrážajú akýkoľvek nedostatok vitamínu B-12 v bunkách. Plazmatické tHcy aj MMA sa akumulujú u pacientov s nedostatkom vitamínu B-12 (Obrázok 2). Vo všeobecnosti má tHcy nízku špecificitu, pretože sa zvyšuje aj u pacientov s nedostatkom folátu a možno aj tiamínu a vitamínu B-6 ( 14 ). V populácii obohatenej folátmi je však špecificita tHcy ako markera nedostatku vitamínu B-12 podstatne lepšia ( 15 ). MMA je citlivý marker nedostatku vitamínu B-12 a zvýšená koncentrácia MMA sa často používa ako zlatý štandard na klasifikáciu stavu pacienta ako deficitného alebo nedeficitného vitamínu B-12. Hlavnými nevýhodami sú nízka špecifickosť hranične zvýšených hodnôt MMA a obmedzená dostupnosť testu ( 16 ).
U inak zdravých jedincov majú všetky 4 testy (vitamín B-12, holoTC, tHcy a MMA) silný vzťah k príjmu vitamínu B-12, pričom koncentrácie v rovnovážnom stave sú pri dennom príjme 4–7 μg vitamínu B-12 ( 17 ). Nepriamo takéto štúdie naznačujú, že všetky 4 markery môžu byť užitočné na sledovanie stavu vitamínu B-12 v populácii v priebehu času.
MERANIE HoloTC
K dispozícii sú tri rôzne typy metód merania holoTC a ako je opísané nižšie, ukázali sme, že tieto metódy poskytujú primerane podobné hodnoty. Prvý publikovaný prístup kombinoval iónovú precipitáciu transkobalamínu s meraním množstva vitamínu B-12 zachyteného v precipitáte ( 18 – 20 ). Lindemans et al ( 21 ) zlepšili tento prístup s použitím protilátok namierených proti transkobalamínu namiesto iónovej separácie a Ulleland et al ( 22 ) vyvinuli verziu tohto prístupu, ktorá zahŕňala meranie zachyteného vitamínu B-12 izotopovým riediacim testom, holoTC-rádioimunotest (RIA). V inej verzii Refsum a kol. ( 9) meral vitamín B-12 pomocou mikrobiologickej metódy. Ďalším prístupom je odstránenie apo-transkobalamínu guľôčkami potiahnutými vitamínom B-12 s následným meraním holoTC, ktorý zostáva v supernatante ( 23 ).
Multicentrická štúdia, do ktorej boli zapojené 4 európske laboratóriá, hodnotila holoTC-RIA (kalibračná krivka: 10–160 pmol/L) a imunosorbentový test s enzýmom viazaným na holoTC (kalibračná krivka: 1,6–100 pmol/l) ( 24 ). Výsledky štúdie ukázali podobné hodnoty naprieč laboratóriami a testovanými metódami. Dlhodobá nepresnosť bola 6 % pre enzýmový imunosorbentový test a > 10 % pre RIA ( 24 ). Výsledky RIA testu boli tiež podobné výsledkom, ktoré Refsum et al ( 9 ) získali s použitím mikrobiologického testu (kalibračná krivka: 1,36–24,5 pmol/l; nepresnosť: 4–7 %).
Dnes bol holoTC-RIA nahradený testom, ktorý využíva holoTC-špecifické monoklonálne protilátky ( 25 ). Na platforme AxSYM (Abbott Labs, North Chicago, IL) má metóda rozsah merania 3–100 pmol/l a celkovú nepresnosť 6–9 %. Výsledky získané touto metódou sa dobre porovnávajú s výsledkami holoTC-RIA ( 26 , 27 ).
DETERMINANTY HoloTC
Keď sa marker používa na monitorovanie stavu vitamínu B-12 v populácii, treba pamätať na to, že zvýšenie koncentrácie holoTC alebo vitamínu B-12 alebo zníženie koncentrácie MMA alebo tHcy inými determinantmi ako je nedostatok vitamínu B-12 predpovedá falošnú dostatočný stav. Je zrejmé, že opak je pravdou pre predikciu falošného nedostatočného stavu.
My a iní sme zdokumentovali determinanty holoTC, ktoré nesúvisia so stavom vitamínu B-12. Výsledky sú zhrnuté nižšie a do určitej miery vo vzťahu k determinantom pre ďalšie markery stavu vitamínu B-12.
Odber a skladovanie krvi
HoloTC, podobne ako vitamín B-12, je stabilný analyt a na odber vzoriek krvi na meranie holoTC nie sú potrebné žiadne špeciálne opatrenia. HoloTC je stabilný aj pri skladovaní pri -20 °C až -70 °C, pravdepodobne roky. Loikas et al ( 28 ) systematicky skúmali stabilitu pri skladovaní pri –70 °C po dobu až 16 mesiacov.
Denná variácia
Hlavným problémom je možné zvýšenie holoTC po príjme potravy bohatej na vitamín B-12. Niekoľko štúdií, ktoré sa zaoberali týmto problémom, ukázalo veľmi obmedzené variácie súvisiace s príjmom normálnej stravy ( 9 , 29 ), a preto je možné odoberať krv ľuďom nalačno aj nepôstnym. Avšak opakovaný príjem vysokých fyziologických dávok vitamínu B-12 (napr. 9 μg 3-krát za 1 deň) zvyšuje koncentráciu holoTC (a v menšej miere aj celkovú koncentráciu vitamínu B-12) do 24 hodín ( 30 ). Toto zistenie sme použili na vývoj klinického testu absorpcie vitamínu B-12, ako je opísané nižšie.
Plazma v porovnaní so sérom
EDTA plazma vykazovala v niektorých štúdiách mierne vyššie hodnoty holoTC alebo celkového transkobalamínu ( 22 , 31 ), v iných nie ( 9 ). Vo všeobecnosti je prijateľné použiť na analýzu koncentrácií holoTC plazmu aj sérum.
Pohlavie, rasa a životný cyklus
HoloTC, podobne ako celkový vitamín B-12, sa v obmedzenom rozsahu líši podľa pohlavia alebo veku. Všimnite si však, že Refsum et al ( 9 ) uvádzajú o niečo nižšie koncentrácie u mladších žien. Na rozdiel od toho sme my a iní pozorovali výrazné zmeny v metabolických markeroch, najmä tHcy, vo vzťahu k veku a pohlaviu ( 32 , 14 ).
Pretože haptokorín klesá, celkový obsah vitamínu B-12 sa tiež znižuje u tehotných žien na ≈ 50 % v termíne v porovnaní s 2 mesiacmi po pôrode. Naproti tomu koncentrácie holoTC zostávajú počas tehotenstva nezmenené ( 33 , 34 ). Z tohto dôvodu je holoTC lepší ako vitamín B-12 na monitorovanie stavu vitamínu B-12 v populačných štúdiách, ktoré zahŕňajú tehotné ženy. Informácie o rasových rozdieloch v koncentráciách holoTC a iných ukazovateľoch stavu vitamínu B-12 sú obmedzené.
Celkový transkobalamín a holoTC
HoloTC predstavuje 5–20 % celkového transkobalamínu ( 23 ). Celkový transkobalamín sa u pacientov s deficitom vitamínu B-12 nemení (E Nexo, nepublikované údaje, 2011). Z tohto dôvodu sme nezískali žiadne ďalšie informácie z merania saturácie transkobalamínu na rozdiel od samotného merania holoTC ( 32 ). Pozorovali sme však pokles celkového transkobalamínu po tom, čo zdravým jedincom bola podávaná denná dávka vitamínu B-12 500 μg. Koncentrácia sa zvýšila smerom k hodnotám predbežného zaťaženia v priebehu nasledujúcich 84 dní ( 35 ). Toto pozorovanie môže súvisieť so skutočnosťou, že bunkový receptor pre transkobalamín, CD320, rozpoznáva skôr holoTC ako apotranskobalamín ( 36 – 38). Po dodaní vitamínu B-12 bunky absorbujú zvýšené množstvo holoTC. Keď sú však bunky nasýtené vitamínom B-12, celkový transkobalamín dosiahne novú rovnováhu.
Transkobalamínové genotypy
Transkobalamín sa vyskytuje v mnohých genotypoch ( 39 ) a niekoľko autorov jasne zdokumentovalo, že prítomný genotyp, najmä P259R (TCN2 776C→G), ovplyvňuje celkovú koncentráciu proteínu. Celkové koncentrácie transkobalamínu sú o ≈20 % nižšie u jedincov s genotypom 776GG ako u jedincov s genotypom 776CC; jedinci s genotypom 776GC majú stredné hodnoty. Distribúcia genotypov sa medzi štúdiami trochu líši, ale je ≈30 % pre P259P (776CC), 50 % pre P259R (776CG) a 20 % pre R259R (776GG) ( 9 ). Koncentrácie HoloTC sú ovplyvnené v oveľa menšej miere transkobalamínovými genotypmi, hoci tento vplyv bol v niektorých štúdiách významný ( 9 , 40 , 41 ).
Iné choroby
Transkobalamín je relatívne malý proteín s molekulovou hmotnosťou ≈40 kDa ( 42 ) a je filtrovaný v obličkách. V dôsledku toho sa koncentrácie holoTC zvyšujú, keď sa znižuje funkcia obličiek ( 32 , 43 ). To isté platí pre celkový vitamín B-12, aj keď v oveľa menšej miere, pretože zdanlivá molekulová hmotnosť haptokorínu prevyšuje molekulovú hmotnosť albumínu ( 44 ). Niektoré štúdie preukázali len okrajový vzťah medzi funkciou obličiek a koncentráciami holoTC a celkového vitamínu B-12 ( 9 , 45 ). Metabolické markery vykazujú výrazné zvýšenie koncentrácie so zvýšením sérového kreatinínu ( 32 , 45). Výsledkom je, že pri použití metabolických markerov je možné nesprávne zaradiť osobu s poškodenou funkciou obličiek na nedostatok vitamínu B-12 a (menej pravdepodobné), že pri užívaní holoTC nebude mať nedostatok.
Odborníci vyjadrili obavy z množstva ďalších stavov, najmä v súvislosti s holoTC a možno aj celkovým vitamínom B-12. Pôvodne sme považovali transkobalamín za proteín akútnej fázy zvýšený pri stavoch, ktoré zahŕňali akútny zápal. Novšie údaje však naznačujú, že koncentrácie transkobalamínu sa zvyšujú iba v podmienkach s aktiváciou makrofágov ( 31 , 46 ). Ďalšie stavy, ktoré môžu zvýšiť koncentrácie holoTC, zahŕňajú ochorenia pečene ( 43 , 47 ) a vývoj autoprotilátok proti transkobalamínu ( 48 , 49 ). Musíme však urobiť ďalšie štúdie, aby sme preskúmali vplyv autoprotilátok vo vzťahu k novej generácii testov holoTC.
REFERENČNÉ INTERVALY HoloTC
Ako sme diskutovali vyššie, v referenčnom intervale pre holoTC sa môžu vyskytnúť mierne rozdiely z dôvodu transkobalamínového genotypu, veku a pohlavia ( 9 , 22 , 23 , 26 , 28 ). Hlásené variácie týchto faktorov sú k dnešnému dňu relatívne malé a pred stanovením potreby upravených referenčných intervalov, napríklad podľa veku, pohlavia a rasy, je potrebné, aby sa touto otázkou zaoberali ďalšie štúdie.
Doteraz publikované referenčné intervaly sú zhrnuté v Tab. 1. Zahrnuli sme len údaje o primerane veľkých skupinách zdravých jedincov. Zdá sa, že súčasný konsenzus je, že vhodný je referenčný interval 40–200 pmol/l. Kým nebudú k dispozícii výsledky z ďalších štúdií, lekári a výskumníci by mali potvrdiť tento interval lokálne pred zavedením holoTC do každodennej klinickej praxe alebo interpretáciou výsledkov v populačných štúdiách.
Tab. 1
Metóda 2 | Ukážka | Referenčný rozsah | n | Odkaz |
μL | pmol/L | |||
Rádioimunoanalýza | 400 | 24–160 | 105 | 22 |
37–170 | 303 | 28 | ||
Mikrobiológia | <150 | 42–160 | 500 | 9 |
ELISA | 100 | 40–150 | 137 | 23 |
Priamy | 200 | 19–130 | 292 | 26 |
36–220 | 276 | 50 |
UŽITOČNOSŤ MERANIA holoTC
Nissen et al ( 51 ) dospeli k záveru, že meranie holoTC a/alebo celkového transkobalamínu je užitočné ako diagnostický nástroj u niekoľkých pacientov s deficitom transkobalamínu. Tento stav vedie k závažným symptómom v ranom detstve a lekári ho musia diagnostikovať čo najskôr, aby sa predišlo trvalému poškodeniu.
Stav vitamínu B-12
Množstvo štúdií predložilo údaje o vzťahu medzi holoTC a celkovými koncentráciami vitamínu B-12 v extrémnom až nedostatočnom príjme vitamínu. Študovali sme zdravých jedincov na dennej perorálnej dávke vitamínu B-12 500 μg a pozorovali sme maximálne zvýšenie holoTC ≈50 % do 3 dní, bez ďalšieho zvýšenia do konca štúdie (84 dní). Vzorec pre vitamín B-12 viazaný na haptokorín bol odlišný. Počiatočná elevácia bola ≈20 %, ale počas celej štúdie sme pozorovali kontinuálny nárast ( 35 ). MMA nepreukázala žiadnu zmenu a zmena tHcy bola pomalšia ako u holoTC ( 52 ). Na druhej strane štúdie na vegánskej populácii s nedostatočným príjmom vitamínu B-12 naznačujú, že holoTC klesá pred zmenami v ostatných markeroch stavu vitamínu B-12 (12 ). Medzi týmito extrémami, holoTC, podobne ako ostatné ukazovatele stavu vitamínu B-12, odráža príjem vitamínu B-12 ( 17 ).
Celkovo vyššie uvedené štúdie naznačujú, že holoTC sa môže ukázať ako najužitočnejšie, ak je cieľom monitorovať populáciu s hraničnou suboptimálnou zásobou vitamínu B-12. Naproti tomu celkový vitamín B-12 môže byť lepší, ak je cieľom monitorovať možnú nadmernú záťaž vitamínu. A nakoniec, ktorýkoľvek z markerov nedostatku vitamínu B-12 sa môže použiť, ak je cieľom rozlíšiť medzi normálnym stavom vitamínu B-12 a zjavným nedostatkom.
Príjem vitamínu B-12
Pozorovanie, že holoTC je markerom akútneho zvýšenia príjmu vitamínu B-12, nás viedlo k vyvinutiu rutinného testu (CobaSorb) na štúdium vychytávania vitamínu B-12. Na vykonanie testu odoberáme vzorky krvi pred a po 1–2 d perorálnom príjme 3-krát 9 μg vitamínu B-12 denne a meriame zvýšenie holoTC. Z analytického hľadiska sme schopní detegovať zvýšenie holoTC ≥10 pmol/l iba vtedy, ak je východisková hodnota holoTC primerane nízka a pôvodne sme odporučili, aby sa test použil len vtedy, ak bola východisková hodnota holoTC <75 pmol/l ( 53 ). V skorej štúdii na kohorte ( n= 17) neschopný absorbovať vitamín B-12 kvôli zdedenému nedostatku buď vnútorného faktora alebo jeho receptora, pozorovali sme, že žiadny z pacientov neabsorboval vitamín B-12, ako bolo posúdené testom CobaSorb. Inými slovami, podľa týchto údajov je citlivosť CobaSorbu 1,00 ( 54 ). Špecifickosť sme vypočítali na 0,98 na základe výsledkov získaných od 57 zdravých jedincov s východiskovou hodnotou holoTC <75 pmol/l ( 53). Neskôr sme vylepšili test CobaSorb, aby sme mohli študovať aj absorpciu vitamínu B-12, ak je základná hodnota holoTC príliš vysoká na to, aby bolo možné použiť pôvodný test. Využili sme pozorovanie, že perorálna dávka vitamínu B-12 sa absorbuje nezmenená (tj ako kyanokobalamín). Na základe tohto pozorovania sme vyvinuli verziu testu CobaSorb, v ktorej meriame zvýšenie množstva kyanokobalamínu viazaného na transkobalamín. Túto verziu testu sme nazvali C-Cobasorb ( 55). Dnes odporúčame použiť CobaSorb na objasnenie toho, či je diagnostikovaný nedostatok vitamínu B-12 spôsobený neschopnosťou vitamín absorbovať, a odporúčame, aby bol test posúdený nasledujúcim spôsobom. Pacienta považujeme za schopného absorbovať vitamín B-12, ak sa holoTC zvýši > 10 pmol/l a > 22 % po 2 dňoch príjmu perorálnej dávky 3-krát 9 μg vitamínu B-12 denne. Odporúčame, aby sa C-CobaSorb vykonal u pacientov s východiskovou hodnotou holoTC > 65 pmol/l a aby sa na základe testu CobaSorb neposúdilo, že absorbujú vitamín B-12 ( 55 ). Zdôrazňujeme, že v súčasnosti sa testy CobaSorb používajú iba na poskytnutie odpovede „áno“ alebo „nie“ súvisiacej s absorpciou vitamínu B-12. Nevieme, či testy budú schopné klasifikovať jednotlivcov s nízkou, ale nie chýbajúcou schopnosťou vstrebávania vitamínu.
Nedostatok vitamínu B-12
My a iní vnímame holoTC ako skorý marker nedostatku vitamínu B-12, ale konečný dôkaz tohto konceptu by si vyžadoval štúdiu, v ktorej by sa sledovala skupina pacientov, pretože ich stav vitamínu B-12 sa posúva z normálneho na zjavný nedostatok. Takáto štúdia nie je uskutočniteľná, pretože by ste mali povinnosť liečiť pacienta hneď, ako sa objavia prvé príznaky nedostatku. Avšak, ako je uvedené v Obrázok 3, poskytujeme nepriame dôkazy, ktoré naznačujú, že holoTC je lepší marker ako vitamín B-12. Analyzovali sme kombinované údaje zo štúdie o starších dospelých žijúcich v komunite ( 56 ) a zo štúdie o pacientoch odoslaných do nemocnice na vyhodnotenie podozrenia na nedostatok vitamínu B-12 ( 32). Obrázok ukazuje, že holoTC zodpovedá za väčšinu zmien vo vitamíne B-12, vyjadrené v relatívnom (horný panel) alebo absolútnom vyjadrení (dolný panel) v skupinách pacientov so zvyšujúcim sa nedostatkom vitamínu B-12, ako sa usudzuje zo zvýšenia MMA hodnoty od 0,25 do >1 μmol. Je zaujímavé, že hladiny holoTC sú znížené, zatiaľ čo celkový obsah vitamínu B-12 sa naďalej zvyšuje v skupinách pacientov bez deficitu vitamínu B-12 podľa hodnôt MMA <0,25 μmol/l. Tento výsledok je v súlade s našimi predchádzajúcimi výsledkami ( 35 ), ktoré ukázali, že dlhodobé zaťaženie vitamínom B-12 má za následok zmenu celkového vitamínu B-12, ale nie holoTC.
Početné štúdie porovnávali účinnosť holoTC s účinkom celkového vitamínu B-12 na identifikáciu pacientov s nedostatkom vitamínu B-12. Väčšina z týchto štúdií použila zvýšenú koncentráciu MMA a možno aj tHcy na identifikáciu jedincov s nedostatkom vitamínu B-12 a bez neho (Tabuľka 2). Všetky štúdie uvedené v Tabuľka 2, zahŕňali pacientov s normálnou funkciou obličiek a všetky tieto štúdie okrem jednej ukázali, že výkonnosť holoTC je lepšia ako výkonnosť vitamínu B-12, nezávisle od hraničnej hodnoty MMA, ktorú použili na klasifikáciu stavu vitamínu B-12 pacientov ( 32 , 56 – 59 ). Jedna štúdia, ktorá ukázala, že vitamín B-12 bol lepší ako holoTC, zahŕňala len veľmi málo pacientov na hodnotenie holoTC ( 59 ). Niekoľko štúdií u pacientov s poruchou funkcie obličiek ukázalo, že holoTC je u týchto pacientov tiež lepší ( 56 , 58 ). Hoci sa zdá, že holoTC identifikuje pacientov so zvýšenými koncentráciami MMA efektívnejšie ako vitamín B-12, Miller et al ( 60) navrhli, že je vhodnejšie použiť kombináciu oboch parametrov.
TABUĽKA 2
Celkový počet subjektov (celkový počet subjektov s nedostatkom vitamínu B-12) | národnosť | Vek | Limity pre MMA (tHcy) | AUC pre holoTC | AUC pre vitamín B-12 | Odkaz |
Y | μmol/l | |||||
806 (24) | dánčina | >18 | >0,75 (>15) | 0.90 | 0.85 | 32 |
1651 (70) | Angličtina | >65 | >0,75 | 0.87 | 0.79 | 56 |
1651 (129) | Angličtina | >65 | >0,45 | 0.80 | 0.73 | 56 |
533 (71) | nemecký | 18–98 | >0,40 | — | 0.72 | 59 |
125 (16) | nemecký | 18–98 | >0,40 | 0.66 | — | 59 |
759 (174) | nemecký | 8–92 | >0,30 | 0.71 | 0.60 | 58 |
204 (68) | nemecky, holandsky | 21–73 | >0,27 | 0.88 | 0.84 | 57 |
Fedosov ( 61 ) nedávno použil matematické modelovanie na klasifikáciu stavu vitamínu B-12 pacientov s použitím všetkých 4 markerov nedostatku (holoTC, celkový vitamín B-12, MMA a tHcy). Potom určil, ako dobre by každý marker predpovedal nedostatok vitamínu B-12, a ukázal, že holoTC [oblasť pod operačnou krivkou prijímača (AUC) = 0,93] je podobný MMA (AUC = 0,92) a lepší ako celkový vitamín B-12 (AUC = 0,88) a tHcy (AUC = 0,87).
ZÁVERY
Pred viac ako 20 rokmi viedli poznatky o fyziológii vitamínu B-12 k názoru, že holoTC môže byť citlivým markerom skorého nedostatku vitamínu B-12. Odvtedy meranie holoTC dospelo. Dnes môžeme konštatovať, že holoTC sa javí ako vhodnejší na diagnostiku nedostatku vitamínu B-12 ako celkový vitamín B-12. Do dnešného dňa však holoTC nezískal širokú klinickú akceptáciu, s najväčšou pravdepodobnosťou kvôli nákladom na test a obmedzenej dostupnosti. Na základe údajov, ktoré uvádzame v tomto prehľade, predpokladáme, že holoTC bude tiež vynikajúcim markerom na monitorovanie stavu vitamínu B-12 v populácii. V súčasnosti existuje silná potreba štúdií, ktoré môžu potvrdiť alebo vyvrátiť túto predpoveď.
Poďakovanie
Povinnosti autorov boli nasledovné—SK: napísal prvý návrh hlavnej časti článku; a EH-L: bol zodpovedný za vyhľadávanie literatúry a napísal prvý návrh, ktorý pokrýval genetické determinanty pre transkobalamín. Obaja autori prispeli k nepretržitej práci a schválili konečný návrh. Ani jeden z autorov nemal žiadne konflikty záujmov, ktoré by mohol vyhlásiť.